Lågtrycksvätskekromatografiska separationsstratifieringssystem: forskning och förberedelse inom biokemi, syntetisk kemi, naturprodukter, läkemedelsutveckling, livsmedelskemi, jordbrukskemi, kosmetika, polymerer och petrokemi. Kan genomföras jonutbyte stratifiering, affinitet stratifiering gel filtrering stratifiering, hydrofobi effekt stratifiering och andra metoder, används för protein, enzymer, nukleosyror, nukleotider, polypeptider, (innehåller / inte innehåller aromatiska aminosyror) och andra ultravioletta absorption av biologiska / icke-biologiska prover separationsanalys, flödesdetektion, är det idealiska valet för biomolekylär rening, det har flera funktioner, enkel användning, ekonomisk och andra egenskaper. En kompakt design som maximerar besparingar på kyllagring och laboratorieutrymme.

Anmärkningar

De olika tekniska indikatorerna för högpresterande dubbla strålar UV-detektor i systemkonfigurationen används för kvantitativ kontroll av läkemedel i nationella läkemedelsfabriker. Instrumentets egenskaper

Protein 280nm/254nm dubbel våglängdsmätning

Proteinmolekylerna innehåller konjugerade dubbelbindningar av aromatiska aminosyror som tyrosin och trysin. De har egenskapen att absorbera ultraviolett ljus, dess absorptionstopp på 280 nm våglängd, och absorptionstoppens optiska densitetsvärde inom denna våglängd är proportionellt till dess koncentration, kan därför användas som grund för proteinkvaliteten och kvantitativ mätning, därför används den ultravioletta absorptionsmetoden på 280nm oftast för kontinuerlig övervakning av proteinkoncentrationen i stratifieringssystemet. Men eftersom olika proteiner har olika innehåll av tyron och trysin, måste det vara nödvändigt att jämföra det rena proteinet som standard för att bestämma exakta mängder, eller redan känna till dess lysdämpningsfaktor som referens. Dessutom har många icke-proteinämnen också en bestämd absorptionsförmåga vid 280 nm våglängd, vilket kan förekomma störningar. Dessa är särskilt allvarligare av nukleinsyror (puriner och pyriminer). Absorptionen vid 280nm är 10 gånger starkare (per gram) än proteiner, men

Nukleinsyra absorberas starkare vid 254nm, och dess absorptionstopp ligger nära 254nm. Nukleinsyrans lysdämpningsfaktor vid 254nm är dubbelt så stor som vid 280nm, medan proteinet tvärtom absorberar 280nm UV större än absorptionsvärdet vid 254nm.

Vanligtvis

Ljusabsorptionsförhållande för rent protein: A280/A254 1,8

Ljusabsorptionsförhållande för ren nukleinsyra: A280/A254 0,5

Därför, när nukleinsyra samtidigt finns i proteinlösningen (vilket är fallet i de flesta biologiska system), måste OD254nm mätas samtidigt med OD280nm. Den verkliga proteinmängden beräknas sedan med hjälp av en empirisk formel, baserat på förhållandet mellan absorptionen av båda våglängderna, för att eliminera effekten av nukleinsyra.

Proteinkoncentration = 1,45 x A280 – 0,74 x A254 (mg/ml)

Denna empiriska formel är upprättad med hjälp av data som mäts av en blandning av proteiner (jäst enololase) och nukleosyra (jäst nukleosyra) i kända olika koncentrationer.

Systemkonfiguration